阿尔及利亚芸香酚含量及体外抗氧化、抗炎和抗菌活性评价 ...

文丨异文录

编辑丨异文录

摘要

植物是多酚等自然抗氧化剂的可贵来源，并具有许多新的的生物学功用。芸香属物种包含芸香属查勒彭斯长度和芸香长度，在阿尔及利亚是广布的种并且被用作治疗各种疾病的药用植物；但是，到目前为止，大多数中止的研讨主要集中在剖析生物碱和精油上。

本研讨的目的是研讨香茶菜地上部分的酚类物质芸香长度并评价其体外抗氧化、抗炎和抗菌性能。总多酚和黄酮类化合物用比色法测定，单个多酚用HPLC-DAD-ESI-MS审定和定量。抗氧化活性用DPPH和β-胡萝卜素实验评价，抗炎活性用抑止牛血清白蛋白变身和HRBC膜稳定法评价。

结果表明芸香提取物富含酚类化合物，总酚和类黄酮含量分别为41.63±0.394毫克GAE/格和13.97±0.33毫克当量/格。共审定出9种酚类化合物，包含3种酚酸和6种黄酮类化合物。芦丁是主要的酚类化合物芸香(464.95微克/克)，其次是丁香酸(179.74微克/克)，柚皮素(109.78微克/克)。芹菜酚类提取物也显现出良好的抗氧化活性，用DPPH和β-胡萝卜素测试的值分别为0.77 mM TE/g DW和0.37 mM β-CE/g DW。

关于抗炎活性，最高测试浓度(200 μg/mL)对白蛋白变身的抑止率为50.61 %，对膜稳定性的抑止率为44.12 %。关于抗菌效果，金黄色葡萄球菌是最青春的细菌，抑菌圈为14.37 mm，MIC值为0.625 mg/mL，其次是李斯特氏菌，以及大肠杆菌。

引见

自然产物长期以来被以为是药物开发中生物活性物质的可贵来源。大多数曾经开发的药物都是从以前用作传统草药的植物物种中提取的。但是，科学家最近试图完整选择植物物种，以为自然是药物发现的化学变更生物活性化学物质的无限供给。

作为化学抗氧化剂的替代品，科学家们对从植物资料中获取自然抗氧化剂越来越感兴味。抗氧化剂是能够避免自由基及其破新性影响的分子。这些抗氧化剂的作用可能处于多个阶段,经过提供氢、减少单线态氧、充任螯合剂和经过各种措施捕获自由基。

大约有40种芸香属，地中海盆地特有的一个一年生高度芳香灌木属。该属散布最广、研讨最深化的三个种芸香属是芸香长度,芸香属查勒彭斯长度，以及芸香属蒙大拿长度的叶子，有令人不快的气息，并且是小的、长方形的、团结的、羽状的和腺状的。除了中心花有五个花瓣外，这朵花有四个花瓣。

芸香自古以来就被用作烹饪和药用草药。这种药用植物在地中海地域长期用于治疗许多炎症疾病。据报道R.格雷沃伦斯具有广谱活性，包含抗微生物、抗氧化、抗糖尿病、抗炎、镇静和解痉特性。

芸香属有超越120种来自几种自然化合物类别的物质，如生物碱、酚酸、类黄酮、香豆素、木质素、精油和呋喃喹啉。酚类化合物是强抗氧化剂，经过贡献一个电子或氢原子来中和自由基。芸香苷被公认用于改善记忆恢复，并具有药理学性质，如抗炎、抗病毒、抗过敏、抗真菌和抗病活性。

在阿尔及利亚，这种植物很普遍，在传统医学中用作退烧药、部分抗毒药、抗恶心和呕吐、便秘、疟疾、贫血、风湿病、胃痛、肠虫、难产、眼和耳疼痛、哮喘和神经官能症。值得一提的是，大多数关于该属的研讨芸香属通常集中于精油、生物碱或香豆素的表征。因而，本研讨旨在对阿尔及利亚的酚类化合物中止审定和定量芸香经过高效液相色谱-二极管阵列联用和电喷雾质谱检测讨论其抗氧化、抗炎和抗菌特性。

结果和讨论

总多酚和黄酮类化合物

自然多酚的充足供给、其低成本消费以及其最小的反作用使得它们被用作开发新的抗疾病药物的主要成分。总酚含量芸香依据古特芬格比色法测定提取物运用福林-西卡尔特试剂。结果表示为毫克没食子酸当量/克提取物，芸香提取物中多酚类物质含量较高，为41.63±0.394mg GAE/g。

格雷沃伦斯显现出良好的类黄酮含量(13.97±0.33毫克当量/克)。这些结果略高于余等人的结果，测得总酚含量为24.96±0.19毫克GAE/克，总黄酮含量为11.90±0.10毫克凯特/克。在阿斯加里安等人中止的另一项研讨中，总酚和类黄酮含量的浓度提取物分别为14.1±0.47毫克GAE/克和15.8±0.19毫克铼/克干提取物。

R.格雷沃伦斯多酚的高效液相色谱-二极管阵列检测器-电喷雾质谱

酚类物质芸香运用HPLC-DAD-ESI-MS。审定了九种化合物，两种二羟基苯甲酸(原儿茶酸和丁香酸)、一种二羟基肉桂酸(香豆酰奎尼酸)、两种黄酮(芹菜素和白杨素)、三种黄酮醇(槲皮素3-D-半乳糖苷、芦丁和异槲皮素)和一种黄烷酮(柚皮素)。运用外部规范的校准曲线对每种已审定的化合物中止定量。总多酚含量为1011.18 μg/g，其中酚酸含量为302.71 μg/g，占总多酚含量的29.93 %，而黄酮类化合物含量为708.47 μg/g，占总多酚含量的70.07 %。中肯定的主要化合物芸香芦丁占45.98 %，丁香酸占17.77 %，柚皮素占10.85 %。

努里等人研讨了黄酮类化合物的地上部分芸香来自伊朗运用二维纸和薄层色谱。审定了以下黄酮类化合物，即槲皮素、山奈酚、芦丁、芹菜素、异鼠李素、白杨素、牡荆素和杨梅素。在另一项研讨中，埃兰萨里等人，肯定苯酚的概略和评价生物活性芸香长度的叶提取物芸香属含有四种酚酸和两种类黄酮。最丰厚的酚酸是p-香豆酸和绿原酸；咖啡酸和原儿茶酸的浓度较低。此外，发现了高水平的类黄酮芸香苷和槲皮素，其中芸香苷绝对丰厚。

的酚类化合物的定性组成和定量含量R.格雷沃伦斯也被梅尔尼克等人研讨过，其中六种黄酮类化合物(芹菜素、芦丁、槲皮素、木犀草素、异槲皮素和金丝桃苷)、四种羟基肉桂酸(绿原酸、迷迭香酸、咖啡酸和p-香豆)中止了审定。在阿斯加里安等人的另一项工作中，肯定咖啡酸是独一的酚酸，此外还有五种黄酮类化合物(芦丁、槲皮素、芹菜素、柚皮素和木犀草素)。在这两篇小哥中，芸香苷被报道为最丰厚的酚类化合物。

抗氧化活性

植物通常具有高含量的抗氧化分子(如类胡萝卜素、多酚、不饱和脂肪酸、维生素、酶和辅因子)，能够捕获自由基。这些化合物因其在预防性和治疗性植物疗法中的潜在用处而取得了特别的关注。食物和食物产品的降解主要是由氧化惹起的。在文献中，一些剖析描画了氧化恢复化合物肃清自由基的才干，以量化食品和生物样品的抗氧化才干。

的抗氧化活性R.格雷沃伦斯运用DPPH和β-胡萝卜素作为氧化剂。这R.格雷沃伦斯酚类提取物显现出良好的抗氧化活性，用DPPH和β-胡萝卜素测试分别为0.77±0.05mM TE/g DW和0.37±0.03mMβ-CE/g DW。这些结果高于余等报道的结果，世卫组织剖析了不同药用和食用植物的抗氧化活性，包含R.格雷沃伦斯。

DPPH实验的结果为0.12±0.00毫米碲/克干重。在另一项研讨中，埃尔默斯蒂里评价了选定的利比亚药用植物提取物的抗氧化和抗胆碱酯酶活性。他们讲演了与我们相似的结果，DPPH值为0.704±0.007毫米TE/g DW。

芸香属抗氧化活性可能与芦丁含量高(464.95 μg/g)有关。芦丁(3，3，4，5，7-五羟基黄酮-3-鼠李糖苷)，其称号源于该植物芸香，也被称为维生素P，黄酮醇存在于植物中，如柑橘属果树水果、葡萄柚、烟草、芦笋、绿茶、果子、荞麦、浆果和芸香是一些其他来源。芸香苷是由黄酮醇苷元槲皮素和二糖鼠李糖基葡萄糖组成的糖苷。芦丁被普遍以为是一种强大的自然抗氧化剂，能够显著降低氧化应激。

各种机制已被肯定担任其抗氧化作用在这两个在试管内和在活生物体内研讨。首先，其化学结构已被证明能直接肃清活性氧(ROS)。其次，它增强GSH合成，并且据信经过增加各种抗氧化酶如CAT和SOD的表白而显著增强细胞氧化防御机制。最后，芸香苷抑止黄嘌呤氧化酶，这与ROS的产生有关。

丁香酸(4-羟基-3，5-二甲氧基苯甲酸)也是丁香中含量最丰厚的酚类化合物之一芸香属提取物(179.74微克/克)。它是没食子酸的3，5-二甲基醚衍生物，自然存在于许多水果、蔬菜和香料中，如小麦、橄榄、南瓜、葡萄、红酒、大麦、大米、黑麦、高粱、燕麦、巴西棕榈、玉米、蘑菇、甘蔗和蜂蜜。在许多体外和体内研讨中，丁香酸被发现是一种有出路的自然抗氧化剂，在总当量抗氧化才干测定中具有高抑止作用，并且对β-胡萝卜素和2，2-二苯基-1-苦基肼基(DPPH)具有良好的自由基肃清效果。

体外抗炎实验

炎症是由多种刺激如音讯、受损细胞和有毒化合物产生的生物免疫系统反响。它经常触及疼痛和增加的蛋白质变身、血管通透性和膜的改动。蛋白质变身是指由于施加外部应力或元素，如强酸或强碱、强无机盐、有机溶剂或热，蛋白质失去其动作和二级结构。当生物蛋白质变身时，它们失去了生物功用，这是众所周知的炎症缘由。

R.格雷沃伦斯提取的抗炎活性物由两人评价在试管内白蛋白变身的抑止和HRBC膜的稳定。结果讲演在中。芸香在两种实验中，提取物以剂量依赖的方式表示出良好的抗炎作用。用最低浓度的提取物(50 μg/mL)处置招致白蛋白变身的抑止率为35.77%；同时，规范品双氯芬酸的效果明显更显著，抑止率为60.63 %。当提取物的浓度增加两倍(100 μg/mL)时，抑止率稍微增加到44.31 %。在提取物的最高测试浓度(200 μg/mL)下，取得了50.61 %的白蛋白变身抑止。另一方面，用规范药物双氯芬酸取得了85.79 %的抑止。

作为其防御作用的一部分，白细胞在炎症期间释放溶酶体酶，包含蛋白酶，招致更多的组织损伤和随后的炎症。细胞膜损伤使细胞更容易遭到自由基诱导的脂质过氧化作用。膜蛋白能够经过调理钠离子和钾离子的转运来控制细胞的体积和含水量，而膜的破新将损伤这一功用。由于红细胞膜相似于溶酶体的膜，抑止红细胞膜溶血能够提供对炎症过程的了解。细胞膜稳定能够经过推迟或限制胞质内容物的溶解和随后的释放来减少组织损伤和炎症。

膜稳定性的百分比芸香属提取物和药物规范双氯芬酸的计算浓度分别为50、100和200 μg/mL。依据结果，膜的稳定性是剂量依赖性的，并且浓度越高，维护作用越强。在最低浓度下，HRBC膜的稳定率为31.18 %芸香属提取物与更新的的百分比55.41 %相比，具有相同浓度的双氯芬酸。应用200微克/毫升的芸香属招致44.12 %的膜稳定性，这依旧不如用双氯芬酸取得的膜稳定性新的(74.78±1.73)。

许多研讨报道了以下物质的抗炎活性芸香。在卢诺特和安拉贝库中止的一项研讨中，摘录R.格雷沃伦斯显著减少角叉菜胶诱导的水肿。25毫克/千克的组合R.格雷沃伦斯吲哚美辛(2 mg/kg)显著减少角叉菜胶诱导的水肿。抗炎活性芸香在马菲斯和海伦的研讨中中止了测试角叉菜胶诱导雄性大白鼠足跖水肿的研讨。的摘录芸香对角叉菜胶诱导的大鼠足爪水肿显现出最大(90.9 %)的抑止作用。这种抑止作用高于规范药物沃维兰(72.72 %)。

一些作者报道了芦丁的抗炎作用芸香属经过抑止脂质过氧化和改善氧化应激。另一项研讨表明，芸香苷可能在大肠中充任槲皮素输送系统。槲皮素的抗炎才干可能归因于其抑止TNF-α诱导的NFκB活化。

抗微生物活性

在过去的几十年中，曾经中止了几项研讨，这些研讨集中于作为抗微生物剂的潜在自然来源的植物，所述抗微生物剂可能有效对立多重抗性菌株，而没有反作用或对环境没有反作用。大多数展开了抗菌活性的研讨芸香属是中止精油，生物碱，或其他芸香属主要是物种R.查勒彭斯.

银杏酚类提取物的抗菌活性芸香针对五种致病菌株，两种革兰氏阳性和三种革兰氏阴性菌株。依据纸片扩散法和微量稀释法分别计算抑菌圈和最小抑菌浓度。结果讲演在中。

依据结果，金黄色葡萄球菌是最青春的细菌，抑菌圈为14.37 mm，MIC值为0.625 mg/mL，其次是李斯特氏菌(11.75毫米，最低抑菌浓度=1.25毫克/毫升)，以及大肠杆菌(10.25毫米，MIC=1.25毫克/毫升)。铜绿假单胞菌是最具抗性的菌株，抑菌圈为9 mm，MIC值为2.5 mg/mL。

革兰氏阴性菌通常比革兰氏阳性菌对立菌药物更具耐药性。由磷脂和脂多糖(LPS)组成的革兰氏阴性菌外膜的共同结构起着新的的作用，由于它担任针对立微生物剂的额外维护，而不影响维持生命所必须的物质交流。阿尔佐雷基和中原也取得了相似的结果，他们研讨了R.格雷沃伦斯反对仙人掌长度单核细胞增生。

南奥里斯他们察看到，一切受试菌株对芸香提取物青春，抑止区为12-17mm，MIC值为0.66-2.64mg/mL。穆夫蒂等人研讨了R.格雷沃伦斯乙醇提取物开启粪肠球菌、金黄色葡萄球菌、化脓性链球菌、大肠杆菌、铜绿假单胞菌，依据他们的发现，大肠杆菌是最青春的细菌，在浓度为100毫克/毫升时，抑菌圈为15.3毫米。

在奶油水果蛋白饼等人中止的另一项研讨中，野生和栽培的甲醇和乙醇提取物R.格雷沃伦斯针对三种革兰氏阳性菌株和三种革兰氏阴性菌铜绿假单胞菌和肠炎沙门氏菌和两种真菌菌株：白色念珠菌和黑曲霉。留意到在开花时节开端时采集的野生芸香表示出最高的抗菌活性。这些MIC值比本研讨中取得的值高10倍，这可能与化学成分有关，化学成分会因生长条件和环境要素而变更。

提取物的抗菌活性可能归因于中审定的酚类化合物R.格雷沃伦斯例如芸香苷、丁香酸、香豆素和柚皮素。多酚化合物是优秀的自然抗菌剂。固然多酚抗菌活性的确切机制尚不分明，但有几种可能的机制。例如，多酚可能会破新细胞壁，招致离子、ATP、检查和氨基酸的走漏。此外，它还能够经过降低促旋酶活性、影响蛋白质生物合成、阻断ATP合成、降低pH水平和影响生物膜构成来抑止DNA合成。

笔者以为：目前的研讨集中在审定多酚的个体芸香并评价在试管内抗氧化和抗炎活性。R.格雷沃伦斯具有较高的总酚含量和黄酮含量。经HPLC-DAD-ESI-MS剖析，审定出9种化合物，其中芦丁含量最高。DPPH和β-胡萝卜素实验表明，该酚类提取物具有显著的抗氧化活性；纸片扩散法和微量稀释法表明，该酚类提取物具有抗菌活性。此外，从最低浓度开端，取得了对白蛋白变身和膜稳定性的良好抑止。这项研讨表明芸香可能被视为抗氧化剂、抗微生物剂和抗炎化合物的自然来源，部合成释了其在阿尔及利亚传统医学中的普遍用处。

参考文献：

阿尔及利亚芸香酚含量及体外抗氧化、抗炎和抗菌活性评价